Introduzione:
RNA, nome scientifico acido ribonucleico, la sua abbreviazione deriva da acido ribonucleico, è un tipo di acido nucleico formato collegando almeno dozzine di ribonucleotidi attraverso legami fosfodiesterici.
La premessa per esplorare l'RNA è estrarre l'RNA totale privo di inquinamento e il principio di base dell'estrazione dell'RNA può essere approssimativamente riassunto come segue:
1. Distruggi prima le cellule
2. Quindi rimuovere le impurità macromolecolari (proteine, lipidi, DNA, ecc.)
3. Infine, l'RNA viene precipitato rimuovendo sali e solventi organici e purificando ulteriormente l'RNA
Passato e presente del metodo di estrazione
La prima generazione del metodo di estrazione dell'RNA è il metodo di precipitazione TRIzol (i reagenti utilizzati includono isotiocianato di guanidina, fenolo, cloroformio, ecc.) inventato da un nonno di nome Piotr Chomczynski e dalla nonna Nicoletta Sacchi, perché questa invenzione consente l'estrazione dell'RNA facile e veloce, da allora ha iniziato l'impennata della ricerca sull'RNA.
Successivamente, il nonno ha venduto questo brevetto a Invitrogen e Invitrogen ha promosso questo metodo nel mondo ed è diventato un metodo ampiamente utilizzato.
Successivamente, Invitrogen è stata acquisita da Thermo!
Prodotto rappresentativo: reagente TRIzol di Invitrogen
Tuttavia, il metodo di precipitazione TRIzol richiede la precipitazione multipla e l'estrazione di RNA e i reagenti utilizzati sono tossici e richiedono molto tempo per funzionare.
Pertanto, è nato il metodo di purificazione enzimatica della colonna di seconda generazione, utilizzando la membrana di gel di silice come materiale specifico di adsorbimento dell'acido nucleico per massimizzare il recupero dell'RNA nel campione rimuovendo al contempo altre impurità.
Il metodo di seconda generazione semplifica l'operazione sulla base di prestazioni stabili, riduce il fattore di rischio e migliora l'efficienza dell'estrazione dell'RNA.
Prodotti rappresentativi: QIAGEN RNeasy e la maggior parte dei prodotti nazionali
Tuttavia, sia i metodi di prima che di seconda generazione richiedono l'uso della DNasi per rimuovere la contaminazione del DNA, il che comporta alcuni inconvenienti per i successivi esperimenti a valle.La DNasi residua ridurrà l'efficienza della trascrizione inversa e ridurrà la sintesi del cDNA del primo filamento, influenzando così l'accuratezza dei risultati.
Pertanto, il metodo di estrazione di terza generazione è ottimizzato sulla base della seconda generazione.L'esperimento non ha bisogno di aggiungere alcun enzima e l'RNA può essere facilmente ottenuto con solo due colonne.
Colonna 1: Colonna di pulizia del DNA per eliminare il DNA
Colonna 2: la colonna solo RNA adsorbe e recupera specificamente l'RNA
Un'operazione così semplice non solo fa risparmiare tempo, ma facilita anche il funzionamento degli esperimenti a valle!
Prodotti rappresentativi: QIAGEN RNeasy Plus eForegeneProdotti della serie di purificazione dell'RNA
(RNeasy Plus)
（di ForegeneKit di isolamento dell'RNA totale della pianta）
Dillo piano!Il kit RNA di Foregene presenta anche un RNase Eraser super facile da usare, che può rimuovere completamente 400μg di RNase sulla superficie solida in 1 minuto, senza aggiungere sostanze tossiche al corpo umano!
Fig1: Grafico comparativo dei processi operativi
I prodotti Foregene possono completare l'estrazione dell'RNA in sole due canzoni, non rendere gli altri gelosi dei progressi del tuo esperimento!
Fig2:Erisultati sperimentali grafico comparativo
La prima generazione (1: TRIzol)
La seconda generazione (2: RNeasy di QIAGEN)
La terza generazione (3: RNeasy plus di QIAGEN, 4: Foregene)
Fig3: grafico qPCR (grafico della curva di amplificazione)
La prima generazione (verde significa TRIzol -, rosso significa TRIzol +)
La seconda generazione (celeste significa QIAGEN RNeasy-, rosso significa QIAGEN RNeasy +)
La terza generazione (blu significa QIAGEN RNeasy plus, verde significa Foregene)
(Nota: il grafico qPCR "-" indica che la DNasi non è stata aggiunta e la contaminazione del DNA non è stata rimossa. Pertanto, il CT è più alto e il risultato non è accurato; "+" indica che la DNasi è stata aggiunta e la contaminazione del DNA è stata rimossa, il risultato è accurato)
Ogni aggiornamento tecnico significa che il funzionamento dell'esperimento si sta sviluppando in una direzione più semplice e più user-friendly.
Foregene mira ad aiutare più ricercatori scientifici a risparmiare tempo e costi sperimentali, ottenere risultati sperimentali di alta qualità e creare insieme risultati di ricerca scientifica più preziosi.
Tempo di pubblicazione: luglio-09-2021
