Esistono due tipi principali di rischi nei laboratori di PCR: rischi per la biosicurezza e rischi di contaminazione da acido nucleico.Il primo danneggia le persone e l'ambiente e il secondo influisce sui risultati dei test PCR.Questo articolo riguarda i punti di monitoraggio del rischio del laboratorio PCR e i corrispondenti livelli di rischio presentati.

01 Divisione del laboratorio PCR

1. Laboratorio di analisi di biologia molecolare

In base ai requisiti dell'articolo 1.1 degli standard di impostazione di base per i laboratori di test di amplificazione genica clinica, i laboratori PCR sono generalmente costituiti da quattro aree: area di conservazione e preparazione dei reagenti, area di preparazione dei campioni, area di amplificazione e area di analisi del prodotto di amplificazione.Se si utilizza il metodo PCR fluorescente in tempo reale, l'area di amplificazione e l'area di analisi possono essere combinate in un'unica area;se si utilizza l'analizzatore PCR completamente automatizzato, l'area di preparazione del campione, l'area di amplificazione e l'area di analisi possono essere combinate in un'unica area.

Il "Workbook for New Coronavirus Nucleic Acid Testing in Medical Institutions (Trial Version 2)" stabilisce che, in linea di principio, i laboratori che eseguono test sugli acidi nucleici del nuovo coronavirus dovrebbero allestire le seguenti aree: area di stoccaggio e preparazione dei reagenti, area di preparazione dei campioni, area di amplificazione e analisi del prodotto.Queste tre aree dovrebbero essere completamente indipendenti l'una dall'altra nello spazio fisico e non ci può essere comunicazione diretta con l'aria.

2. Sala preparazione campioni

Sebbene i campioni possano essere preparati semplicemente nell'area di preparazione dei campioni, è comunque necessaria una sala di preparazione dei campioni speciale quando si trattano campioni complessi e un gran numero di campioni.La sala di preparazione dei campioni presenta un rischio elevato di sicurezza biologica e contaminazione da acido nucleico.

3. Sala trattamento rifiuti

Un trattamento improprio dei rifiuti comporterà anche enormi rischi di biosicurezza e contaminazione da acido nucleico per il laboratorio.Pertanto, la sala di trattamento dei rifiuti deve essere monitorata regolarmente.

02 Punti di monitoraggio del rischio nei laboratori PCR

I laboratori separati sono suddivisi in sala di preparazione dei campioni, area di stoccaggio e preparazione dei reagenti, area di preparazione dei campioni, area di amplificazione e analisi del prodotto e sala di trattamento dei rifiuti.

In base al tipo di sito di campionamento, è suddiviso in superficie, strumento, campione, monitoraggio ambientale e pipetta.

Il livello di rischio varia da basso ad alto da una stella★ a tre stelle★★★.

1. Sala di preparazione del campione:

Viene utilizzato per la registrazione, la preparazione e l'inattivazione dei campioni e il rischio per la sicurezza biologica è il più elevato.Poiché i campioni non vengono estratti e amplificati, ad eccezione delle pipette che vengono spesso a contatto con i campioni, il rischio di contaminazione da acido nucleico in altre parti è basso.

1-4 Campionamento nei punti di monitoraggio

5-8 Campionamento al punto di monitoraggio

Campionamento punto di monitoraggio 9-12

1. Area di stoccaggio e preparazione dei reagenti:

Viene utilizzato per la preparazione dei reagenti di conservazione, la dispensazione dei reagenti e la preparazione della miscela di reazione di amplificazione, nonché la conservazione e la preparazione di materiali di consumo come provette per centrifuga e puntali per pipette.Non vi è alcun contatto diretto con i campioni e nessun acido nucleico positivo in quest'area, quindi il rischio per la biosicurezza e il rischio di contaminazione da acido nucleico sono bassi.

13-16 Campionamento nei punti di monitoraggio

17-22 Campionamento al monitoraggio
3. Punti dell'area di preparazione del campione

Viene utilizzato per aprire il cilindro di trasferimento, inattivare il campione (se applicabile), estrarre l'acido nucleico e aggiungerlo alla provetta di reazione di amplificazione, ecc. Quest'area può comportare l'elaborazione e l'apertura dei campioni, il rischio per la sicurezza biologica è elevato e viene eseguita l'estrazione dell'acido nucleico e il rischio di contaminazione dell'acido nucleico è medio-alto.

29 Campionamento nei punti di monitoraggio

4. Area di amplificazione e analisi del prodotto:

Utilizzato per l'amplificazione dell'acido nucleico.Questa zona non comporta l'elaborazione del campione e il rischio per la sicurezza biologica è basso.L'amplificazione dell'acido nucleico è principalmente in questa zona e il rischio di contaminazione dell'acido nucleico è il più alto.

38 Campionamento nei punti di monitoraggio
5. Locale per il trattamento dei rifiuti:

Utilizzato per l'elaborazione ad alta pressione dei campioni.I rischi per la sicurezza biologica coinvolti nel trattamento dei campioni in quest'area sono relativamente elevati.Si raccomanda che i prodotti di amplificazione dell'acido nucleico siano trattati come rifiuti sanitari.L'alta pressione non è raccomandata e il rischio di contaminazione da acido nucleico è basso.

43-44 Campionamento nei punti di monitoraggio

03 Implementa

Questa volta abbiamo elencato 44 punti di monitoraggio.Si stima che molte persone debbano chiedere, hanno bisogno di fare così tanti punti?Sì, fai tutto!Ti suggerisco di condurre prima una valutazione del rischio del tuo laboratorio, che può essere eseguita in base al rischio da alto a basso, puoi anche monitorare lo stesso tipo di campioni insieme, oppure puoi sviluppare un piano di campionamento per il monitoraggio regolare.In breve, ogni laboratorio può fare il proprio piano di implementazione in base alla propria situazione.Il rischio maggiore per i laboratori di analisi è ignorare i rischi.