Kit di isolamento dell'RNA virale per la purificazione dell'RNA virale da plasma, siero e altri campioni
Descrizione del corredo:
Cat.No.RE-02011/02014
Per la purificazione dell'RNA virale da plasma, siero, fluidi corporei privi di cellule, surnatanti di colture cellulari.
Isola e purifica rapidamente l'RNA virale da campioni come plasma, siero, fluidi corporei privi di cellule e surnatanti di colture cellulari.
-Non c'è bisogno di preoccuparsi della degradazione dell'RNA.L'intero kit è privo di RNasi
-Semplice: tutte le operazioni vengono completate a temperatura ambiente
-Veloce: l'operazione può essere completata in 20 minuti
-Alta resa di RNA: la colonna solo RNA e la formula unica possono purificare efficacemente l'RNA
-Sicuro: nessun reagente organico utilizzato
-Grande capacità di elaborazione dei campioni: è possibile elaborare ogni volta fino a 200 μl di campioni.
-Alta qualità: l'RNA purificato è altamente puro, privo di proteine e altre impurità e può soddisfare varie applicazioni sperimentali a valle.
Descrizioni
Il kit utilizza la colonna spin e la formula sviluppate da Foregene, che possono estrarre in modo efficiente RNA virale di elevata purezza e alta qualità da campioni come plasma, siero, fluido corporeo privo di cellule e surnatante di coltura cellulare.Il kit aggiunge specificamente acrilammide lineare, che può facilmente catturare piccole quantità di RNA dai campioni.La colonna solo RNA può legare efficacemente l'RNA.Il kit può processare un gran numero di campioni contemporaneamente.
L'intero kit non contiene RNase, quindi l'RNA purificato non verrà degradato.Buffer viRW1 e Buffer viRW2 possono garantire che l'acido nucleico virale ottenuto sia privo di proteine, nucleasi o altre impurità, che possono essere utilizzate direttamente per esperimenti di biologia molecolare a valle.
Specifiche
50 preparazioni, 200 preparazioni
Componenti del kit
| Acrilammide lineare |
| Tampone viRL |
| Buffer viRW1, Buffer viRW2 |
| ddH senza RNasi2O |
| Colonna solo RNA |
| Istruzioni |
Caratteristiche e vantaggi
-Non c'è bisogno di preoccuparsi della degradazione dell'RNA.L'intero kit è privo di RNasi
-Semplice: tutte le operazioni vengono completate a temperatura ambiente
-Veloce: l'operazione può essere completata in 20 minuti
-Alta resa di RNA: la colonna solo RNA e la formula unica possono purificare efficacemente l'RNA
-Sicuro: nessun reagente organico utilizzato
-Grande capacità di elaborazione dei campioni: è possibile elaborare ogni volta fino a 200 μl di campioni.
-Alta qualità: l'RNA purificato è altamente puro, privo di proteine e altre impurità e può soddisfare varie applicazioni sperimentali a valle.
Parametri del kit
Applicazione kit:
È adatto per l'estrazione e la purificazione dell'RNA virale in campioni come plasma, siero, fluido corporeo privo di cellule e surnatante di colture cellulari.
Flusso di lavoro
Condizioni di archiviazione
- Il kit può essere conservato per 24 mesi a temperatura ambiente (15-25 ℃) o 2-8 ℃ per tempi più lunghi.
-La soluzione di acrilammide lineare può essere conservata a temperatura ambiente per 7 giorni.Dopo aver ricevuto il kit, estrarre la soluzione di acrilammide lineare e conservarla a -20 ℃.
-Dopo aver aggiunto l'acrilammide lineare al tampone viRL, può essere conservato a 2-8℃ fino a 48 ore.Si prega di utilizzare la soluzione appena preparata.
Guide per l'analisi dei problemi
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Nessun RNA può essere estratto o la resa di acido nucleico è bassa
Di solito ci sono molti fattori che influenzano l'efficienza del recupero, come: contenuto di RNA del campione, metodo di funzionamento, volume di eluizione, ecc.
Analisi delle cause comuni：
1.Bagno di ghiaccio o centrifugazione a bassa temperatura (4 °C) durante il funzionamento.
Suggerimento: funzionamento a temperatura ambiente (15-25 °C), mai bagno di ghiaccio e centrifuga a bassa temperatura.
2. Conservazione impropria del campione o conservazione del campione troppo lunga.
Suggerimento: conservare i campioni a -80 ° C o congelarli in azoto liquido ed evitare l'uso ripetuto di congelamento e scongelamento;provare a utilizzare campioni appena raccolti per l'estrazione dell'RNA.
3.Lisi del campione insufficiente
Raccomandazione: assicurarsi che il campione e la soluzione di lavoro (acrilammide lineare) siano stati accuratamente miscelati e incubati per 10 minuti a temperatura ambiente (15-25 ° C)
4.L'eluente è stato aggiunto in modo errato
Raccomandazione: assicurarsi che ddH2O privo di RNasi sia aggiunto al centro della membrana della colonna di purificazione
5.Volume improprio di etanolo anidro nel tampone viRW2
Suggerimento: seguire le istruzioni, aggiungere il volume corretto di etanolo anidro al tampone viRW2 e miscelare bene prima di utilizzare il kit.
6. Utilizzo improprio del campione.
Suggerimento: 200μl di campione per 500μl di Buffer viRL.Un volume di campione eccessivo comporterà una riduzione della velocità di estrazione dell'RNA.
7.Volume di eluizione improprio o eluizione incompleta.
Suggerimento: il volume dell'eluente della colonna di purificazione è di 30-50 μl;se l'effetto di eluizione non è soddisfacente, si consiglia di aggiungere ddH RNase-Free preriscaldato2O ed estendere il tempo di posizionamento a temperatura ambiente, ad esempio 5-10 minuti
8. La colonna di purificazione presenta residui di etanolo dopo il risciacquo nel tampone viRW2.
Suggerimento: se l'etanolo rimane ancora dopo il risciacquo nel tampone viRW2 e la centrifugazione a tubo vuoto per 2 minuti, la colonna di purificazione può essere lasciata a temperatura ambiente per 5 minuti dopo la centrifugazione a tubo vuoto per rimuovere completamente l'etanolo rimanente.
La degradazione delle molecole di RNA purificato
La qualità dell'RNA purificato è correlata a fattori quali la conservazione del campione, la contaminazione da RNasi e il funzionamento.
Analisi delle cause comuni：
1. I campioni raccolti non sono stati salvati in tempo.
Suggerimento: se il campione non viene utilizzato in tempo dopo la raccolta, conservarlo immediatamente a -80 ℃ o azoto liquido.Per l'estrazione di molecole di RNA, cercare di utilizzare campioni appena raccolti quando possibile.
2. I campioni raccolti venivano congelati e scongelati ripetutamente.
Suggerimento: evitare il congelamento e lo scongelamento ripetuto (non più di una volta) durante la raccolta e la conservazione del campione, altrimenti la resa di acido nucleico diminuirà.
3. L'RNasi è stata introdotta in sala operatoria o non sono stati indossati guanti monouso, maschere, ecc.
Suggerimento: l'esperimento di estrazione delle molecole di RNA viene eseguito al meglio in una sala operatoria separata dell'RNA e il tavolo sperimentale viene pulito prima dell'esperimento.Indossare guanti e maschere monouso durante l'esperimento per evitare la degradazione dell'RNA causata dall'introduzione di RNasi.
4.Il reagente è contaminato da RNasi durante l'uso.
Suggerimento: sostituire con il nuovo kit di isolamento dell'RNA virale per gli esperimenti correlati.
5. La contaminazione da RNasi delle provette per centrifuga, dei puntali delle pipette, ecc. Suggerimento: assicurarsi che le provette per centrifuga, i puntali delle pipette e le pipette siano tutti privi di RNasi.
Le molecole di RNA purificate hanno influenzato gli esperimenti a valle
Le molecole di RNA purificate dalla colonna di purificazione influenzeranno gli esperimenti a valle se ci sono troppi ioni salini o proteine, come: trascrizione inversa, Northern Blot, ecc.
1. Ci sono ioni salini rimanenti nelle molecole di RNA eluite.
Raccomandazione: assicurarsi che il volume corretto di etanolo anidro sia stato aggiunto al tampone viRW2 e lavare la colonna di purificazione due volte in base alla velocità di centrifugazione corretta indicata nelle istruzioni operative; se sono ancora presenti ioni salini, è possibile aggiungere il tampone viRW2 alla colonna di purificazione e lasciarla a temperatura ambiente per 5 minuti.Quindi eseguire la centrifugazione per rimuovere al massimo la contaminazione da ioni salini
2. Ci sono residui di etanolo nelle molecole di RNA eluite
Suggerimento: una volta verificato che le colonne di purificazione sono state risciacquate dal tampone viRW2, eseguire la centrifugazione a provetta vuota in base alla velocità di centrifuga indicata nelle istruzioni operative.Se c'è ancora etanolo rimanente, può essere lasciato per 5 minuti a temperatura ambiente dopo una centrifugazione a provetta vuota per rimuovere il più possibile l'etanolo rimanente.
Manuali di istruzioni:
Manuale di istruzioni del kit di isolamento dell'RNA virale
