Introduzione:

Le molecole di RNA possono interagire ampiamente con altre molecole biologiche, come proteine, DNA e RNA, e quindi esistere nelle cellule e negli organismi sotto forma di complessi macromolecolari.Tra questi, i complessi RNA-proteina sono l'esistenza e la funzione dell'RNA Una delle forme importanti di.Il pull-down dell'RNA è un metodo classico per lo screening e l'identificazione delle molecole di RNA, in particolare delle proteine ​​interagenti delle molecole di lncRNA, ed è riconosciuto dalla maggior parte dei ricercatori e da autorevoli riviste accademiche internazionali.Oggi FORREGENE condividerà con te il principio sperimentale e il processo tecnico del pull-down dell'RNA, forse puoi usarlo

1. Il principio sperimentale della tecnologia pull down dell'RNA:

Trascrizione e sintesi in vitro di frammenti di lncRNA o lncRNA bersaglio marcati con biotina (inclusi frammenti di RNA utilizzati come controlli positivi e negativi) e incubazione con estratti cellulari;utilizzare sfere magnetiche ancorate all'avidina per raccogliere i complessi RNA-proteina o RNA-RNA. Dopo un accurato lavaggio, il complesso viene eluito.Se si rileva la molecola bersaglio proteica che interagisce con lncRNA, eseguire l'elettroforesi proteica sul prodotto RNA-pull down, rilevare la proteina bersaglio mediante colorazione argento e tagliare il gel per la spettrometria di massa;eseguire anche direttamente la verifica western blot sul prodotto pull-down;se rilevato Per le molecole target di RNA che interagiscono con lncRNA, i prodotti di RNA-pull down vengono sottoposti all'estrazione dell'RNA e viene eseguito il rilevamento specifico di qRT-PCR.

2. Processo di esperimento della tecnologia pull down dell'RNA:

3. Servizio tecnico per RNA pull down di FOREGENE:

Coltura cellulare

Preparazione dell'estratto di proteine ​​totali cellulari/nucleari/plasmatiche

Esperimento di abbattimento dell'RNA

Elettroforesi SDS-PAGE, macchia d'argento

Spettrometria di massa ed esperimenti WB

Rapporto sperimentale

4. Caso sperimentale

La figura seguente mostra i risultati del pull down dell'RNA di FJ Bio-Bio e del rilevamento dell'elettroforesi SDS-PAGE, in cui la freccia rossa segna la banda di differenza:

Il gruppo di ricerca del professor Song Xu dell'Università di Sichuan ha accumulato 15 anni di accumulazione a lungo termine nel campo della ricerca sull'lncRNA.Foregene Bio e il gruppo di ricerca del professor Song Xu hanno collaborato per lanciare la tecnologia pull down dell'RNA di lncRNA, che ti darà un risultato soddisfacente per il tuo esperimento.