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Quali sono le differenze tra PCR, RT-PCR, qPCR e RT-qPCR
La PCR è un metodo utilizzato per amplificare il DNA da una piccola quantità di modello di DNA.La RT-PCR utilizza la trascrizione inversa per produrre un modello di DNA da una fonte di RNA che può quindi essere amplificato.PCR e RT-PCR sono tipicamente reazioni endpoint, mentre qPCR e RT-qPCR utilizzano la cinetica della velocità di sintesi del prodotto...Per saperne di più -
L'avanguardia nella scoperta di farmaci: mirare all'RNA con piccole molecole
Il vaccino mRNA di Pfizer per il COVID ha riacceso la passione per l’uso dell’acido ribonucleico (RNA) come bersaglio terapeutico.Tuttavia, prendere di mira l’RNA con piccole molecole è estremamente impegnativo.L'RNA ha solo quattro elementi costitutivi: adenina (A), citosina (C), guanina (G) e uracile (U) che sostituisce la timina...Per saperne di più -
Cosa sono i farmaci a base di acido nucleico?
I “farmaci a base di acido nucleico” utilizzano “acido nucleico”, che si riferisce a sostanze come DNA e RNA che controllano le informazioni genetiche, come farmaci.Questi consentono di colpire molecole come mRNA e miRNA che non possono essere prese di mira con i tradizionali farmaci a basso peso molecolare e i farmaci anticorpali, e c'è un g...Per saperne di più -
Alcune esperienze sui siRNA nella RT-PCR
1. Conoscenze di base (se vuoi vedere la parte sperimentale, passa direttamente alla seconda parte) Essendo una reazione derivata della PCR convenzionale, la PCR in tempo reale monitora principalmente la variazione della quantità di prodotto di amplificazione in ciascun ciclo di amplificazione della PCR reazione in tempo reale...Per saperne di più -
Riepilogo dettagliato del metodo di ottimizzazione del sistema di reazione sperimentale RT-PCR
一、Aumentare la sensibilità del sistema di reazione: 1. Isolare RNA di alta qualità: La sintesi riuscita del cDNA proviene da RNA di alta qualità.L'RNA di alta qualità dovrebbe essere almeno a lunghezza intera e privo di inibitori della trascrittasi inversa come EDTA o SDS.La qualità dell'RNA determina la massima a...Per saperne di più -
Progettazione completa del primer per PCR e dettagli della PCR
Base di progettazione del primer (è possibile risolvere il 99% dei problemi) 1. Lunghezza del primer: il libro di testo richiede 15-30 bp, solitamente circa 20 bp.La condizione effettiva è migliore che sia 18-24 bp per garantire la specificità, ma più lungo è, meglio è, un primer troppo lungo ridurrà anche la specificità e la resa.2. Prima...Per saperne di più -
Precauzioni per qRT-PCR compilate scrupolosamente dal medico senior
Tutti parlano del principio dell'esperimento qRT-PCR, della progettazione dei primer, dell'interpretazione dei risultati, ecc., ma penso che dovrei condividere con voi il funzionamento sperimentale della qRT-PCR.È piccolo, ma è una questione di risultati.Prima di eseguire qRT-PCR, dobbiamo avere una chiara comprensione del nostro...Per saperne di più -
Precauzioni per RT-qPCR
L'esperimento RT-qPCR include l'estrazione dell'RNA e la valutazione della qualità, la trascrizione inversa e i tre passaggi qPCR, ogni passaggio prevede molte precauzioni, che introdurremo in dettaglio di seguito.Ⅰ.Valutazione della qualità dell'RNA Nell'esperimento RT-qPCR, dopo il completamento dell'estrazione dell'RNA, ...Per saperne di più -
Un'introduzione approfondita alla PCR in tempo reale
1. Comprensione iniziale In questa fase, dobbiamo comprendere alcuni concetti e terminologia, in modo da evitare di commettere errori di fronte ai nostri senior, come ad esempio: D: Qual è la differenza tra RT-PCR, qPCR, Real-time PCR, e RT-PCR in tempo reale?Risposta: RT-PCR è la PCR a trascrizione inversa (reverse t...Per saperne di più -
PCR, PCR multipla, PCR in situ, PCR inversa, RT-PCR, qPCR（1）– PCR
PCR, PCR multipla, PCR in situ, PCR inversa, RT-PCR, qPCR（1）– PCR Analizzeremo i concetti, i passaggi e i dettagli delle varie PCR Ⅰ.La reazione a catena della polimerasi PCR, denominata PCR, è una tecnologia biologica molecolare utilizzata per ingrandire specifici frammenti di DNA.Può essere considerato un...Per saperne di più -
Principio sperimentale della qRT-PCR
RT-qPCR è sviluppato dalla normale tecnologia PCR.Aggiunge sostanze chimiche fluorescenti (coloranti fluorescenti o sonde fluorescenti) al tradizionale sistema di reazione PCR e rileva il processo di ricottura ed estensione della PCR in tempo reale in base ai diversi meccanismi luminescenti.Insegna fluorescente...Per saperne di più -
Riepilogo dettagliato del metodo di ottimizzazione del sistema di reazione sperimentale RT-PCR
Ⅰ.Aumentare la sensibilità del sistema di reazione: 1. Separare l'RNA di alta qualità: la sintesi riuscita del cDNA proviene da RNA di alta qualità.L'RNA di alta qualità dovrebbe garantire almeno un tempo totale più lungo e non contenere inibitori che non contengano enzimi di registrazione, come EDTA o SDS.La quali...Per saperne di più
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