La nascita della PCR
PCR (reazione a catena della polimerasi)
Sono passati più di 30 anni dall'invenzione della reazione a catena della polimerasi.Da più di 30 anni, dopo che numerosi studiosi in tutto il mondo continuano ad integrare e migliorare, la tecnologia PCR è diventata il metodo di ricerca di base più diffuso e frequentemente utilizzato e più importante nell'intero campo delle scienze della vita.
La TouchDown PCR, la PCR in tempo reale, la Multi PCR, ecc. Sviluppate sulla base dell'ampia applicazione della tecnologia PCR tradizionale, così come la PCR digitale recentemente emersa (PCR digitale), hanno notevolmente arricchito i metodi di ricerca della maggior parte dei ricercatori scientifici e hanno notevolmente accelerato il processo di sviluppo delle moderne scienze della vita, in particolare la biologia molecolare, ha dato grandi contributi allo studio della vita e della natura dell'umanità nel suo insieme.
Difetti della tecnologia PCR tradizionale
Separazione complessa dell'acido nucleico eestrazione:
★ Tecnologia PCR tradizionale: richiesta
★ Tecnologia derivata dalla PCR: richiesta
★ Campioni di DNA e RNA: grandi differenze, requisiti operativi difficili
★ Rischi per il corpo: i reagenti tossici danneggiano il corpo
La tecnologia PCR tradizionale e la tecnologia derivata hanno come prerequisito la separazione e la purificazione dell'acido nucleico
Qualsiasi campione biologico deve passare attraverso una serie di elaborazioni complicate e noiose per ottenere campioni di acido nucleico che soddisfino i requisiti della tecnologia PCR.
La separazione e l'estrazione di DNA e RNA è sempre stata un'attività fondamentale che i ricercatori scientifici competenti devono ripetere ogni giorno.
A causa delle enormi differenze tra i campioni, anche i processi di separazione ed estrazione di DNA e RNA sono molto diversi.Questo lavoro richiede un alto livello di competenza tecnica per gli operatori.Le tradizionali tecniche di separazione ed estrazione richiedono un contatto a lungo termine con alcuni reagenti chimici altamente tossici.Provocherà danni irreversibili al corpo dell'operatore e persino danni diretti durante l'esperimento.
Allo stesso tempo, per coloro che hanno un gran numero di campioni da studiare, la separazione e l'estrazione degli acidi nucleici è un compito laborioso.
I kit di isolamento ed estrazione dell'acido nucleico sul mercato sono ormai maturi e ci sono molte marche, ma sono più o meno gli stessi.Che si tratti di un kit centrifugo con colonna a membrana in gel di silice o di un kit metodo con biglie magnetiche, richiede molto tempo ed è costoso.Oltre al costo del kit, ci sono anche requisiti speciali per le attrezzature di laboratorio.La stazione di lavoro automatizzata utilizzata nel metodo della biglia magnetica è un'apparecchiatura di alto valore su larga scala molto tipica, che rappresenta una spesa enorme per il laboratorio.
In sintesi
Prima di condurre esperimenti di PCR, il pretrattamento dei campioni è un inevitabile e sempre grattacapo per i ricercatori.Come risolvere questo problema e se gli esperimenti di PCR possono essere eseguiti senza la separazione e l'estrazione degli acidi nucleici è sempre stato il pensiero della maggior parte dei ricercatori scientifici e del personale di laboratorio clinico.
La soluzione di Foregene
Dopo anni di scrupolose ricerche sulla tecnologia Direct PCR e sui relativi kit, Forgene ha superato con successo molti colli di bottiglia e ha ottenuto con successo la PCR diretta per molti tipi di campioni diversi con una forte resistenza e adattabilità, consentendo ai ricercatori di sbarazzarsi della scomoda e pericolosa separazione ed estrazione degli acidi nucleici.Ciò ridurrà notevolmente l'intensità del lavoro di tutti, accelererà il processo dell'esperimento e farà risparmiare i costi della ricerca scientifica e dei test.
Comprensione e conoscenza di Forgene di DirectPCR
Innanzitutto, la tecnologia DirectPCR è una tecnologia PCR diretta per vari campioni di tessuti biologici.In questa condizione tecnica, non è necessario separare ed estrarre gli acidi nucleici e il campione di tessuto viene utilizzato direttamente come oggetto e i primer del gene bersaglio vengono aggiunti per la reazione PCR.
In secondo luogo, la tecnologia DirectPCR non è solo una tradizionale tecnologia di amplificazione del modello di DNA, ma include anche la PCR di trascrizione inversa del modello di RNA.
In terzo luogo, la tecnologia DirectPCR non solo esegue direttamente reazioni PCR qualitative di routine su campioni di tessuto, ma include anche reazioni qPCR in tempo reale, che richiedono che il sistema di reazione abbia una forte capacità di resistere all'interferenza della fluorescenza di fondo e di antagonizzare gli estintori di fluorescenza endogeni.
In quarto luogo, i campioni di tessuto presi di mira dalla tecnologia DirectPCR richiedono solo il rilascio di stampi di acido nucleico e non rimuovono proteine, polisaccaridi, ioni salini, ecc. che interferiscono con la reazione PCR.Ciò richiede che la polimerasi dell'acido nucleico e la miscela PCR nel sistema di reazione abbiano un'eccellente anti-reversibilità e adattabilità e possano garantire l'attività enzimatica e l'accuratezza della replicazione in condizioni complesse.
In quinto luogo, i campioni di tessuto presi di mira dalla tecnologia DirectPCR non sono stati sottoposti ad alcun trattamento di arricchimento dell'acido nucleico e la quantità di stampo è molto ridotta, il che richiede una sensibilità e un'efficienza di amplificazione estremamente elevate del sistema di reazione.
Conclusione
La tecnologia DirectPCR è uno degli sviluppi tecnologici e delle innovazioni più importanti degli ultimi 30 anni dalla nascita della tecnologia PCR.Forgene è e continuerà ad essere un pioniere e innovatore di questa tecnologia.
La prospettiva di applicazione della tecnologia DirectPCR è molto ampia.Il continuo miglioramento e la promozione di questa tecnologia porterà sicuramente cambiamenti sovversivi alla ricerca scientifica e al lavoro di ispezione.Questa è una rivoluzione della tecnologia PCR.
Tempo di pubblicazione: 21 febbraio 2017
