L'enzima Taq hot-start è ampiamente utilizzato.Rispetto alla normale DNA polimerasi, l'enzima Taq hot-start può evitare efficacemente un'amplificazione non specifica e la formazione di dimeri primer e può migliorare efficacemente il tasso di successo dell'amplificazione del gene bersaglio.Soprattutto nel campo dei test genetici, l'enzima Taq hot-start è stato identificato come uno standard obbligatorio nel settore e la normale DNA polimerasi non dovrebbe essere utilizzata.Come si può vedere da quanto sopra, gli enzimi Taq hot-start sono ampiamente utilizzati.Al momento, ci sono molte marche di enzimi Taq hot-start sul mercato interno, ma non ci sono molti enzimi Taq hot-start di alta qualità.Di fronte a così tanti prodotti enzimatici Taq hot-start, come dovremmo scegliere?

1. Selezionare l'enzima Taq hot-start con elevata efficienza di amplificazione

L'efficienza dell'amplificazione della PCR è strettamente correlata alle prestazioni dell'enzima Taq.Dopo che un buon sistema di reazione enzimatica Taq è stato ottimizzato, l'efficienza di amplificazione è superiore al 95% e l'intervallo di amplificazione della quantità di templato iniziale è ampio.È possibile ottenere un'amplificazione soddisfacente quando il contenuto del gene target è basso e non è facile essere avvelenati quando la quantità di modello è elevata e il periodo di amplificazione esponenziale è lungo.Per l'enzima Taq con scarse prestazioni, anche se il sistema di reazione è stato ottimizzato per molte volte, l'efficienza di amplificazione è ancora inferiore al 90%, la forma a "S" della curva di amplificazione non è evidente, la pendenza è piccola e la curva è piatta.Quando la quantità di templato è bassa, non può essere amplificata e quando la quantità di templato è elevata, l'effetto di amplificazione non è ideale.Pertanto, la selezione di DNA polimerasi con elevata efficienza di amplificazione è fondamentale per il successo di PCR e qPCR.

2. Seleziona l'enzima Taq hot-start con un forte potere enzimatico

Il potere enzimatico dell'enzima Taq è correlato all'efficienza di amplificazione.In generale, maggiore è il potere enzimatico dell'enzima Taq hot-start, più lungo è il periodo di crescita esponenziale dell'amplificazione della PCR, più tipica è la curva a "S", maggiore è il valore del segnale di fluorescenza e più adatto per il rilevamento della PCR multiplex.Le DNA polimerasi di marca con debole potere enzimatico possono generalmente supportare solo reazioni 2-plex.Quando si eseguono reazioni 3-plex, la curva di amplificazione è bassa, il valore del segnale di fluorescenza è basso e non esiste una curva di amplificazione tipica, quindi i risultati sono difficili da giudicare.

3. Selezionare un enzima Taq hot-start ad alta sensibilità

In generale, la DNA polimerasi ha un'elevata efficienza di amplificazione e un'elevata sensibilità, ma ci sono anche incoerenze.Se l'abbondanza del gene bersaglio del campione da amplificare è bassa, si consiglia di testare la sensibilità di amplificazione dell'enzima Taq.Il metodo di rilevamento più comune consiste nell'eseguire una diluizione del gradiente di 10 volte o 5 volte del frammento del plasmide del gene bersaglio, eseguire il rilevamento PCR alla diluizione inferiore e selezionare l'enzima Taq hot-start con una maggiore sensibilità di rilevamento.

Da quanto sopra si può vedere che i ricercatori devono scegliere in base alle proprie esigenze sperimentali e alle condizioni di finanziamento.È meglio eseguire un esperimento di amplificazione della diluizione del gradiente per rilevare l'efficienza e la sensibilità dell'amplificazione dell'enzima Taq hot-start.

Un esempio di Foregene's Taq DNA polimerasi:

Foreasy HS Taq DNA polimerasi

Descrizione

Foreasy HS Taq DNA Polymerase è una DNA polimerasi espressa nei batteri di ingegneria Escherichia coli mediante la tecnologia di ricombinazione genica.L'enzima è combinato con un buffer di reazione unico, che rende il prodotto altamente resistente e compatibile, e può utilizzare direttamente il lisato del campione (sistema Foregene Lysis) come modello per le reazioni di rilevamento.

Applicazione

Rilevazione PCR qualitativa e PCR quantitativa di modelli purificati e modelli non purificati.

Controllo di qualità

1. Nessuna attività nucleasica esogena rilevata

2.Metodo PCR per rilevare il DNA genomico residuo senza ospite

3. Può amplificare efficacemente i geni a copia singola nel genoma umano

4. Conservare a temperatura ambiente per una settimana, nessun cambiamento di attività evidente

Dettagli del prodotto: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/