Fabbrica OEM per master mix multiplex ad alta fedeltà Rt-Qpcr 2X One-Step
Eccellente Per cominciare, e Consumer Supreme è la nostra linea guida per fornire i migliori servizi ai nostri acquirenti. In questi giorni, stiamo facendo del nostro meglio per essere tra i migliori esportatori del nostro settore per soddisfare gli acquirenti molto più bisogno di OEM Factory per High Fidelity Rt-Qpcr 2X One-Step Multiplex Master Mix, Promettiamo di fare del nostro meglio per offrirti prodotti e servizi economici e di alta qualità.
Eccellente Per cominciare, e Consumer Supreme è la nostra linea guida per fornire i migliori servizi ai nostri acquirenti. In questi giorni, stiamo facendo del nostro meglio per essere tra i migliori esportatori del nostro settore per soddisfare le esigenze degli acquirenti molto piùCina Taq DNA polimerasi e Qpcr, Con il servizio superiore ed eccezionale, siamo ben sviluppati insieme ai nostri clienti.Competenza e know-how assicurano che godiamo sempre della fiducia dei nostri clienti nelle nostre attività commerciali."Qualità", "onestà" e "servizio" è il nostro principio.La nostra lealtà e i nostri impegni rimangono rispettosamente al vostro servizio.Contattaci oggi Per ulteriori informazioni, contattaci ora.
Principi di progettazione dei primer per PCR in tempo reale
Primer in avanti e primer inverso
Per la Real Time PCR, il design del primer è molto importante.I primer sono correlati alla specificità e all'efficienza dell'amplificazione PCR e possono essere progettati con riferimento ai seguenti principi:
- Lunghezza del primer: 18-30 bp.
- Contenuto in GC: 40-60%.
- Valore Tm: il software di progettazione del primer, come Primer 5, può fornire il valore Tm del primer.I valori Tm dei primer a monte ea valle dovrebbero essere il più vicini possibile.Si può utilizzare anche la formula di calcolo Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Quando si esegue la PCR, viene generalmente selezionata come temperatura di ricottura una temperatura inferiore al valore Tm del primer di 5 °C (il corrispondente aumento della temperatura di ricottura può aumentare la specificità della reazione PCR).
- Primer e prodotti PCR:
- La lunghezza del prodotto di amplificazione PCR del primer di progettazione è preferibilmente di 100-150 bp.
- I primer di progettazione nell'area strutturale secondaria del modello dovrebbero essere evitati il più possibile.
- Evitare la formazione di 2 o più basi complementari tra le estremità 3′ dei primer a monte e a valle.
- Base terminale Primer 3′ non può essere presente con 3 G o C consecutivi aggiuntivi.
- I primer stessi non possono avere strutture complementari, altrimenti si formerà una struttura a forcina che influirà sull'amplificazione della PCR.
- ATCG dovrebbe essere distribuito il più uniformemente possibile nella sequenza dei primer e la base terminale 3′ dovrebbe essere evitata come T.
Appendice1:Cell direttoRT-qPCR Kit comppacchetto supplemento t
1.Soluzione per la lisi cellulare
Soluzione di lisi cellulare | |||
Componenti del kit (sistema di lisi a 24 pozzetti/pozzetto) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 tonnellate | 500 t | ||
ParteIO | Tampone CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Proteasi Plus II | 400 microlitri | 1 millilitro × 2 | |
Tampone ST | 1 millilitro × 2 | 10 millilitri | |
ParteII | Cancellatore di DNA | 400 microlitri | 1 millilitro × 2 |
Miscela RT | |
Componenti del kit (sistema di reazione da 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 t | |
5 × Mix RT diretto | 800 microlitri |
ddH senza RNasi2O | 1,7 ml × 2 |
Miscela qPCR | ||
Componenti del kit (sistema di reazione da 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 t | 1000 t | |
2 × Direct qPCR Mix-Taqman | 1 millilitro × 2 | 1,7 ml × 6 |
20 × colorante di riferimento ROX | 40 microlitri | 200 microlitri |
ddH senza RNasi2O | 1,7 ml | 10 millilitri |
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Principi di progettazione dei primer per PCR in tempo reale
Primer in avanti e primer inverso
Per la Real Time PCR, il design del primer è molto importante.I primer sono correlati alla specificità e all'efficienza dell'amplificazione PCR e possono essere progettati con riferimento ai seguenti principi:
- Lunghezza del primer: 18-30 bp.
- Contenuto in GC: 40-60%.
- Valore Tm: il software di progettazione del primer, come Primer 5, può fornire il valore Tm del primer.I valori Tm dei primer a monte ea valle dovrebbero essere il più vicini possibile.Si può utilizzare anche la formula di calcolo Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Quando si esegue la PCR, viene generalmente selezionata come temperatura di ricottura una temperatura inferiore al valore Tm del primer di 5 °C (il corrispondente aumento della temperatura di ricottura può aumentare la specificità della reazione PCR).
- Primer e prodotti PCR:
- La lunghezza del prodotto di amplificazione PCR del primer di progettazione è preferibilmente di 100-150 bp.
- I primer di progettazione nell'area strutturale secondaria del modello dovrebbero essere evitati il più possibile.
- Evitare la formazione di 2 o più basi complementari tra le estremità 3′ dei primer a monte e a valle.
- Base terminale Primer 3′ non può essere presente con 3 G o C consecutivi aggiuntivi.
- I primer stessi non possono avere strutture complementari, altrimenti si formerà una struttura a forcina che influirà sull'amplificazione della PCR.
- ATCG dovrebbe essere distribuito il più uniformemente possibile nella sequenza dei primer e la base terminale 3′ dovrebbe essere evitata come T.
Appendice1:Cell direttoRT-qPCR Kit comppacchetto supplemento t
1.Soluzione per la lisi cellulare
Soluzione di lisi cellulare | |||
Componenti del kit (sistema di lisi a 24 pozzetti/pozzetto) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 tonnellate | 500 t | ||
ParteIO | Tampone CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Proteasi Plus II | 400 microlitri | 1 millilitro × 2 | |
Tampone ST | 1 millilitro × 2 | 10 millilitri | |
ParteII | Cancellatore di DNA | 400 microlitri | 1 millilitro × 2 |
Miscela RT | |
Componenti del kit (sistema di reazione da 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 t | |
5 × Mix RT diretto | 800 microlitri |
ddH senza RNasi2O | 1,7 ml × 2 |
Miscela qPCR | ||
Componenti del kit (sistema di reazione da 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 t | 1000 t | |
2 × Direct qPCR Mix-Taqman | 1 millilitro × 2 | 1,7 ml × 6 |
20 × colorante di riferimento ROX | 40 microlitri | 200 microlitri |
ddH senza RNasi2O | 1,7 ml | 10 millilitri |
Manuali di istruzioni: