Kit ForeDirect RT-qPCR
Descrizione del corredo:
◮Per l'amplificazione diretta in tempo reale dell'RNA da raccolte di tamponi senza processi di purificazione dell'RNA.Questo kit completa i cicli qRT-PCR entro un'ora.La miscela enzimatica è una miscela ottimizzata di trascrittasi inversa, DNA polimerasi Taq Hot-Start, inibitore della RNasi.Il tampone di reazione contiene tutti i componenti richiesti, compresi i componenti ottimizzati del tampone, Mg2+, dUTP e dNTP.
Descrizione
Il kit ForeDirect RT-qPCR è progettato per l'amplificazione diretta in tempo reale dell'RNA da raccolte di tamponi senza processi di purificazione dell'RNA.Questo kit completa i cicli qRT-PCR entro un'ora.La miscela enzimatica è una miscela ottimizzata di trascrittasi inversa, DNA polimerasi Taq Hot-Start, inibitore della RNasi.Il tampone di reazione contiene tutti i componenti richiesti, compresi i componenti ottimizzati del tampone, Mg2+, dUTP e dNTP.
Specifiche
100 T
Componenti del kit
| Agente distaccante di acido nucleico |
| protettore dell'RNA |
| Tampone 2 × RT-qPCR |
| Miscela di enzimi (Taq&M-MLV) |
| Istruzioni |
Applicazione PCR
1. Una volta che le provette di reazione per PCR sono state brevemente centrifugate, collocarle nel serbatoio del campione dello strumento di amplificazione.
2. Protocollo termico
| Fare un passo | Temperatura | Tempo | Cicli | |
| 1 | Trascrizione inversa | 50℃ | 15 min | 1 |
| 2 | Pre-denaturazione | 95℃ | 1 minuto | 1 |
| 3 | Denaturazione | 95℃ | 10 secondi | 42 |
| 4 | Ricottura/estensione | 60℃ | 30 secondi | |
Nota:Il segnale fluorescente è stato rilevato immediatamente dopo la fase di estensione di ciascun ciclo.
3. Dopo l'impostazione, salvare il file ed eseguire il programma di reazione.
Fasi operative
Prima della preparazione dei reagenti, tutti i reagenti nel kit devono essere scongelati a temperatura ambiente e miscelati delicatamente.
Preparazione del reagente
1. Preparare la miscela di rilascio dell'acido nucleico
| Componente | Volume per campione o controllo |
| Agente distaccante di acido nucleico | 5μL |
| protettore dell'RNA | 0,5 microlitri |
2. Preparare la miscela di reazione
| Componente | Volume per campione o controllo |
| Tampone 2 × RT-qPCR | 15 microlitri |
| Miscela di enzimi (Taq&M-MLV) | 1,5 microlitri |
| Primer e sonde | 1μL |
Conservazione e durata
-Il kit deve essere conservato a -20± 5℃.Il periodo di validità è di 12 mesi.
-Evitare ripetuti cicli di congelamento-scongelamento (<5 cicli).
