QuickEasyᵀᴹ Kit PCR in tempo reale-Taqman
Descrizioni
Il 2× QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman fornito da QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman kit è un sistema di master mix di nuova generazione progettato per la reazione di amplificazione Real Time PCR utilizzando sonde fluorescenti specifiche.Il suo nucleo Foregene HS Taq DNA Polymerase si basa sulla modifica dell'anticorpo, utilizzato in combinazione con il sistema PCR ulteriormente ottimizzato Foregene, ha una maggiore specificità ed efficienza di amplificazione.Rispetto al normale mix PCR, ha una maggiore capacità di amplificazione e un tasso di mancata corrispondenza inferiore.Può essere utilizzato nella reazione PCR quantitativa a fluorescenza per ridurre l'amplificazione non specifica e migliorare l'accuratezza della PCR.Può migliorare notevolmente la specificità del prodotto e la sensibilità della reazione.Allo stesso tempo, ROX è stato fornito come colorante di riferimento interno.
Il QuickFacileTMIl kit Real Time PCR-Taqman ha un ampio campo di applicazione per la quantità di modello e può ottenere una buona curva standard in diverse regioni quantitative e può quantificare e rilevare accuratamente i geni bersaglio con buona ripetibilità e alta affidabilità.
Specifiche
200 preparazioni,500 preparazioni,1000 preparazioni,2000 Preparativi
Componenti del kit
VeloceFacileTMKit PCR in tempo reale-Taqman(20microlitrisistema) | ||||
Contenuto del kit | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 preparazioni | 500 preparazioni | 1000 preparazioni | 2000 Preparativi | |
2×PrestoFacileTM PCR reale Mescolare-Taqman | 1 millilitro×2 | 1,7 ml×3 | 1,7 ml×6 | 1,7 ml×12 |
20×Colorante di riferimento ROX | 200microlitri | 0,5ml | 1 millilitro | 1 millilitro×2 |
ddH senza DNasi2O | 1,7 ml | 1,7 ml×2 | 10ml | 20ml |
SE TU | 1pezzo | 1pezzo | 1pezzo | 1pezzo |
Caratteristiche e vantaggi
■ L'esclusivo sistema di ottimizzazione PCR rende 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman più compatibile.
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymerase ha una maggiore efficienza di amplificazione, una maggiore sensibilità di amplificazione e una maggiore specificità di amplificazione.
■ 2× VeloceFacileTM Real PCR Mix -Taqman utilizza un sistema unico ottimizzato da Foregene per migliorare la sensibilità e la specificità del rilevamento della sonda sequenza-specifica, che può essere utilizzato per la genotipizzazione e la determinazione della variazione del numero di copie e ottenere risultati accurati.
■ Questo prodotto viene fornito con il colorante di riferimento interno ROX, che può essere utilizzato per eliminare lo sfondo del segnale e l'errore di segnale tra i pozzetti, che è conveniente per i clienti da utilizzare in diversi tipi di strumenti PCR quantitativi.
Applicazione kit
■ PCR quantitativa in fluorescenza per l'analisi quantitativa del templato;
■ camplificazione PCR convenzionale;
■ Può essere utilizzato per il rilevamento degli alleli.
Conservazione e durata
Il kit deve essere conservato a -20°C al buio;se utilizzato frequentemente può essere conservato anche a 4°C per un breve periodo di tempo (consumare entro 10 giorni).
Principi di progettazione dei primer per PCR in tempo reale
Primer in avanti e primer inverso
Per la Real Time PCR, il design del primer è molto importante.I primer sono correlati alla specificità e all'efficienza dell'amplificazione PCR e possono essere progettati con riferimento ai seguenti principi:
Lunghezza del primer: 18-30 bp.
Contenuto in GC: 40-60%.
Valore Tm: il software di progettazione del primer, come Primer 5, può fornire il valore Tm del primer.I valori Tm dei primer a monte ea valle dovrebbero essere il più vicini possibile.Si può utilizzare anche la formula di calcolo Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Quando si esegue la PCR, viene generalmente selezionata come temperatura di ricottura una temperatura inferiore al valore Tm del primer di 5 °C (il corrispondente aumento della temperatura di ricottura può aumentare la specificità della reazione PCR).
Primer e prodotti PCR:
La lunghezza del prodotto di amplificazione PCR del primer di progettazione è preferibilmente di 100-150 bp.
I primer di progettazione nell'area strutturale secondaria del modello dovrebbero essere evitati il più possibile.
Evitare la formazione di 2 o più basi complementari tra le estremità 3′ dei primer a monte e a valle.
Base terminale Primer 3′ non può essere presente con 3 G o C consecutivi aggiuntivi.
I primer stessi non possono avere strutture complementari, altrimenti si formerà una struttura a forcina che influirà sull'amplificazione della PCR.
ATCG dovrebbe essere distribuito il più uniformemente possibile nella sequenza dei primer e la base terminale 3′ dovrebbe essere evitata come T.
Appendice 1: Cell Direct RT-qPCR Kit componente pacchetto supplementare
1.Soluzione di lisi cellulare
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Componenti del kit (sistema di lisi a 24 pozzetti/pozzetto) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 tonnellate | 500 t | ||
ParteIO | Tampone CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Proteasi Plus II | 400 microlitri | 1 millilitro × 2 | |
Tampone ST | 1 millilitro × 2 | 10 millilitri | |
ParteII | Cancellatore di DNA | 400 microlitri | 1 millilitro × 2 |
2.RT Mescolare
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Componenti del kit (sistema di reazione da 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 t | |
5 × Mix RT diretto | 800 microlitri |
ddH senza RNasi2O | 1,7 ml × 2 |
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Componenti del kit (sistema di reazione da 20 μl) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 t | 1000 t | |
2 × Direct qPCR Mix-SYBR | 1 millilitro × 2 | 1,7 ml × 6 |
Colorante di riferimento 50× ROX | 40 microlitri | 200 microlitri |
ddH senza RNasi2O | 1,7 ml | 10 millilitri |